"內參即是內部參照(Internal Control),對于哺乳動物細胞表達來說一般是指由管家基因編碼表達的蛋白(Housekeeping Proteins),它們在各組織和細胞中的表達相對恒定,在檢測蛋白的表達水平變化時常用它來做參照物。在Western Blotting 實驗中,除了需要進行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上樣電泳、轉膜、靶蛋白抗體孵育、顯色等步驟以外,還需要進行內參的檢測,以校正蛋白質定量、上樣過程中存在的實驗誤差,保證實驗結果的準確性。要檢測一個基因的表達產物是否正確,或者比較表達產物量的相對變化,首選方法是Western Blot。在Western Blotting中使用內參的步驟是用他用內參對應的抗體檢測內參,這樣在檢測目的產物的同時可以檢測內參的表達,由于內參在各組織和細胞中的表達相對恒定,借助檢測每個樣品內參的量就可以用于校正上樣誤差,這樣半定量的結果才更為可信。此外使用內參可以作為空白對照,檢測蛋白轉膜情況是否完全、整個Western Blot顯色或者發光體系是否正常。三羊開肽生物可以提供beta-Actin、GAPDH等內參,質優價廉,歡迎選購。 "
"標簽抗體(Tag Antibody)可用于檢測各種商品化表達載體上的標簽序列(Flag、His、GST、GFP、Myc、HA、Trx等),借以分析檢目的蛋白的表達含量及其功能。其原理是抗原—抗體反應,這些標簽抗體可以高度特異地結合對應的標簽融合蛋白。
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